聚合酶链式反应(PCR),DNA扩增,是在分子生物学中使用的规定的工艺。PCR技术在医学和传染病的诊断,法医和研究应用取得了很大进展。有关治疗方案和临床疗效的决策往往是根据患者的细胞DNA和RNA分析。确保适当的污染控制保证医生获得**好的结果。
DNA聚合酶和PCR分析是高度容易受到污染。鉴于PCR是与在同一平板上的多个患者样品许多临床诊断应用中使用,污染可以通过数千个,数百万的DNA序列拷贝的承载。如果污染物在反应初期推出,则误差以指数的方式,导致虚假或不准确的结果放大。
PCR污染的**常见的原因:
实验室装置的优化工作流PCR
创建一个适当的实验室环境,建立一个单向流两种方式来防止PCR污染。为了确保适当的设施控制,质量保证人员将建立具体到他们的实验室空间和现有设备的尺寸文档标准化协议。人员应认真培训,并提供获得书面程序。
这种单向工作流程涉及以下5个**佳做法:
而大型实验室对每个PCR反应在工厂内建立独立的房间的豪华,小型实验室使用的PCR罩或类似的死气箱(罩无风机),以创造必要的污染防治的分离。
避免PCR工作站的操作员污染
污染的任何实验室贡献**大的是运营商。为了减轻这种,运营商遵守建立的单向工作流程和维持适当的实验室齿轮是重要的。按照这些提示,以消除运营商的污染:
PCR抽油烟机,消毒和操作员安全
的PCR罩可以配备抗微生物UV灯,其在设定的时间间隔操作以消毒的工作环境。UV-C照射可能是有害的,因此工人应该是走出了房间,而紫外线灯是从事。如果这是不可能的,但是,实验室的工作人员**始终这些灯在工作时佩戴合适的防护装备。重要的是,配备有UV灯罩被构造适当抗紫外线材料。
推荐移液器在PCR抽油烟机
选择容积式移液器障碍提示,以防止从一个样品到下结转。这些移液器是理想的,因为与可支配微量注射器提示的挥发性液体和高粘度样品的工作。容积式移液器不仅能提供更高的**度,相比于空气置换移液器他们也提供出色的保护样本。
结论
污染的PCR反应可以通过以下基本实验室的**佳实践并结合具体的敏感PCR应用一些专门的技术来控制。理想情况下,用于研究遗传物质的实验室设备不应被用于其它实验; 即使有合适的清洗协议,仍然存在交叉污染的机会。通过下面的详细,记录协议提高工作效率和准确性。